菌种接种的方法和注意事项

菌种接种的方法和注意事项

在接种前应准备好接种工具、菌种及已灭菌冷却好的菌种培养基。接种达到无菌要求应注意以下几点：

（1）接种前先用2%～3%的来苏尔喷雾消毒；

（2）用气雾消毒盒熏蒸，用量为3～4g/m3，熏蒸半小时；

（3）有条件的栽培户接种前，接种场所应用30 W紫外线灯照射半小时；

（4）菌种要纯正，无污染；

（5）手、菌种瓶及接种工具用75%的酒精擦洗消毒；

（6）接种钩、勺等工具应在酒精灯火焰上灼烧灭菌；

（7）接种方法正确，接种人员操作熟练，配合默契；

（8）接种过程中，接种工具碰到有菌的地方应重新灼烧灭菌；

（9）接种量适中，均匀一致；

（10）接种时间一般每次1～1.5h，或以接种室温度不超过30℃为宜。

什么是无菌操作？怎样才能做到无菌操作？

（1）无菌操作　任何一个操作过程都要注意避免把其他任何无关的菌体带入到培养基中。

（2）要做到无菌操作，必须注意两点：①严格树立无菌观念；②严格遵循无菌操作规程。

无菌操作规程主要有以下四点：

①任何操作必须在无菌条件下进行。

②任何操作器具都必须经过消毒处理。

③任何一种培养基开口时，都必须倾斜向下，并用火焰封口。棉塞也应适当燎烤后再塞回试管。

④任何操作必须做到快、准、稳。

简述组织分离法的操作过程。

操作过程（以伞菌类为例）：

种菇选择（优良品种；色、形正常，生长健壮，无病虫害；含水率少）→种菇消毒（用75%酒精棉球擦拭子实体或用0.1%升汞溶液浸泡1～2min，再用无菌水冲洗）→切取组织块（无菌操作）→移接组织块至斜面（无菌操作）→培养（25℃左右）培养7～14d，菌丝长满试管斜面即可。